更新時間:2024-05-22
真核生物中染色質的基本結構單位是核小體,其由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。每個核小體又是由兩個亞基構成的,而每個亞基包括H2A、H2B、H3和H4這四個組蛋白。組蛋白尾部的蛋白結構域富含帶正電荷的堿性氨基酸,能夠與DNA中帶負電荷的磷酸基團相互作用。
真核生物中染色質的基本結構單位是核小體,其由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。每個核小體又是由兩個亞基構成的,而每個亞基包括H2A、H2B、H3和H4這四個組蛋白。組蛋白尾部的蛋白結構域富含帶正電荷的堿性氨基酸,能夠與DNA中帶負電荷的磷酸基團相互作用。其最N末端部分不參與核小體組裝,而是從核心結構中突出,更適合與相鄰環境進行相互作用,因此易受翻譯后修飾(PTM)的影響。在四種不同的組蛋白質中,組蛋白H3和H4的尾部比H2A和H2B更容易發生PTM。
蛋白質翻譯后修飾 (PTM) 通過功能基團或蛋白質的共價添加、調節亞基的蛋白水解切割或整個蛋白質的降解來增加蛋白質組的功能多樣性。這些修飾包括磷酸化、糖基化、泛素化、亞硝基化、甲基化、乙?;⒅|化和蛋白水解,幾乎影響正常細胞生物學和發病機制的所有方面。組蛋白PTM抗體是表觀遺傳學研究(如染色質免疫沉淀(ChIP)、免疫染色和免疫印跡)中的關鍵元素。然而,許多抗體不能特異識別預定目標。此外,目前市面上的組蛋白抗體以多克隆抗體居多,在使用前需要廣泛驗證。EpiCypher在CUT&RUN和CUT&Tag中篩選了數百種抗體,并通過了獨-有的SNAP-Certification技術進行驗證,為研究者提供了可識別經過修飾的組蛋白和相關細胞靶點的組蛋白PTM抗體。
特異性
準確的CUT&RUN和CUT&Tag分析需要特異性抗體。標準驗證方法無法區分特異性與非特異性PTM抗體。即使是被高度引用的抗體也無法滿足對靶向分析的最-低期望(見下圖)。SNAP-Certification抗體的交叉反應性低于20%,確保了精確可靠的數據。
高效性
高效的CUT&Tag和CUT&RUN抗體可以從減少的細胞數中進行可靠的定位。SNAP-Certification抗體經過高效驗證,可在細胞滴定中產生可重復的譜圖。
SNAP-Certified™抗體具有多重優勢:
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產品名稱 | 貨號 | 規格 |
H3K27me3 Antibody, SNAP-Certified™ for CUT&RUN and CUT&Tag | 13-0055 | 100 µg |
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H3K4me1 Antibody, SNAP-Certified™ for CUT&RUN and CUT&Tag | 13-0057 | 100 µg |
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